SEPARAÇÃO DE PIGMENTOS VEGETAIS POR CROMATOGRAFIA EM PAPEL
Tempo médio para a execução do experimento: 50 minutos.
PROBLEMATIZAÇÃO
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O que você entende por “Cromatografia”?
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O que são pigmentos? E fotopigmentos?
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Você relaciona algum pigmento à fotossíntese? Qual?
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Para os organismos fotossintetizantes, seria vantajoso possuir diferentes tipos de fotopigmentos? Justifique.
OBJETIVO
Identificar alguns pigmentos extraídos de determinados vegetais e separá-los utilizando uma técnica cromatográfica.
MATERIAIS
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06 almofarizes e 06 Pistilos (ou 06 potes e 06 socadores);
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Tiras de papel filtro;
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06 béqueres (ou 06 copos de plástico transparentes);
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Tesoura e faca;
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06 pinças;
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Álcool etílico 70 %;
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06 peneiras (ou coador);
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06 vidros de relógio (ou tampas de pote);
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01repolho roxo;
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Folhas verdes (de ou de outro vegetal);
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01pimentão amarelo;
PROCEDIMENTO
1 - Cortar (ou rasgar) os vegetais em pedaços pequenos e colocar cada um em um almofariz (pote ou copo);
2 - Triturar cada vegetal com o pistilo (ou socador);
3 - Adicionar álcool etílico até cobrir os vegetais e macerar novamente;
4 - Deixar extraindo por 15 minutos;
5 - Coar o macerado (vegetais macerados + álcool) usando uma peneira ou coador e separar o extrato alcoólico em um béquer; (reservar a massa de vegetais para descartar, posteriormente);
6 - Mergulhar uma tira de papel filtro, em posição vertical, em cada béquer contendo os extratos alcoólicos; manter, aproximadamente 0,5 cm da tira imerso (em contato com a solução) ;
7 - Aguardar 30 min, (observar e anotar o que está acontecendo);
8 - Retirar a tira de papel de filtro, com cuidado, usando a pinça;
9 - Colocar as tiras para secar dentro do vidro de relógio (ou outro suporte).
Professor,
Lembre-se de alertar os estudantes quanto ao cuidado com o manuseio dos extratos alcoólicos (inflamável). Trabalhar em ambiente arejado;
A tabela abaixo pode ser disponibilizada para os grupos registrarem os resultados.
TABELA DE RESULTADOS
VEGETAIS:
PIGMENTOS IDENTIFICADOS:
Repolho Roxo
Beterraba
Cenoura
Folhas Verdes
Pimentão Amarelo
Tomate
RESULTADOS ESPERADOS
Os pigmentos que dão cor aos vegetais foram extraídos em álcool etílico, obtendo-se um extrato alcoólico (com cor). As substâncias extraídas foram submetidas à separação, utilizando cromatografia em papel. As diferentes cores que constituem a mistura poderão ser observadas nas tiras de papel, após a corrida cromatográfica, indicando a presença de pigmentos variados nas leguminosas utilizadas.
O álcool vai migrando no papel de filtro e carrega as substâncias do extrato (amostra) que têm maior afinidade com ele. A cor verde refere-se à clorofila, a cor amarela ao caroteno, a roxa é da antocianina e a marrom, geralmente, é dos compostos orgânicos apolares. Os fotopigmentos são muito importantes para a absorção de energia luminosa, principalmente as clorofilas.
DISCUSSÃO
# Qual o objetivo da cromatografia?
# Durante o processo de trituração dos vegetais, o que pode ser observado, ou seja, o que acontece? O cheiro fica mais ativo ou não? Por quê? E a cor? Fica mais clara ou mais intensa?
# Como os pigmentos deslocam de uma borda do papel para outra, em uma altura diferente do líquido do copo?
# É possível afirmar, por meio do experimento, se o vegetal é fotossintetizante ou não? Justifique sua resposta.
# Em quais experimentos foram observadas maiores variações de cores? O que essa variação de cores pode informar acerca do vegetal investigado?
# Em todos os experimentos foi observada a presença da clorofila?
Retomar A Problematização
Retomar as discussões em relação às hipóteses levantadas na problematização, confrontando as respostas preliminares dos estudantes com aquelas após a realização das atividades experimentais.
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Você pode usar, basicamente, a mesma montagem e materiais desse experimento e investigar outros pontos do processo fotossintético. Abaixo, há uma lista de sugestões.
- Misturar quantidades iguais de todos os extratos em um único béquer;
- Colocar uma tira de papel filtro e aguardar 30 min;
- Retirar a fita e colocar para secar;
- Observar o resultado.
- Você também pode incluir essa etapa ao experimento descrito acima.
Se o tempo for curto ou o número de estudantes for pequeno, você pode trabalhar com menos vegetais.
Professor,
Faça suas anotações sobre as respostas dos estudantes:
Em geral, as respostas foram similares ou totalmente diferentes?
Os estudantes foram mais detalhistas?
Falaram sobre aspectos que não tinham considerado antes?
REFERÊNCIA
PIBID. Extraindo pigmentos vegetais. Disponível em: <http://pibidergs.blogspot.com/2016/03/kit-extraindo-pigmentos-vegetais.html>. Acesso em 12/05/2019.